1. Ngadeteksi absorbance leyuran RNA

Nyerep dina 280, 320, 230, sareng 260 nm ngagambarkeun nilai asam nukléat, latar (kekeruhan larutan), konsentrasi uyah, sareng bahan organik masing-masing sapertos protéin.Umumna ukur katingal dina OD260 / OD280 (Rasio, Urang Sunda).Nalika 1.8 ~ 2.0, urang mikir yén kontaminasi protéin atawa zat organik lianna di RNA bisa ditolerir, tapi kudu dicatet yén nalika Tris dipaké salaku panyangga pikeun ngadeteksi absorbance, nilai R bisa jadi leuwih gede ti 2 (umumna kudu <2.2).Nalika R<1.8, polusi protéin atawa zat organik lianna dina leyuran leuwih atra, sarta nasib RNA bisa ditangtukeun nurutkeun pangabutuh.Lamun R>2.2, hartina RNA geus dihidrolisis jadi asam nukléat tunggal.
 
2. Pola éléktroforétik RNA
Sacara umum, gél denaturing dianggo pikeun éléktroforésis RNA, tapi upami éta ngan ukur pikeun ngadeteksi kualitas RNA, gél denaturing henteu diperyogikeun, sareng gél agarose biasa tiasa dianggo.Tujuan éléktroforésis nyaéta pikeun ngadeteksi integritas pita 28S sareng 18S sareng rasiona, atanapi integritas smear mRNA.Sacara umum, upami pita 28S sareng 18S terang, jelas, sareng seukeut (ngarujuk kana ujung pita anu jelas), sareng kacaangan 28S langkung ti dua kali tina pita 18S, kami nganggap kualitas RNA anu saé.
Di luhur nyaéta dua padika anu biasa urang anggo, tapi henteu tina dua metode ieu tiasa jelas-jelas nyarioskeun ka urang naha aya residual RNase dina larutan RNA.Upami aya sajumlah leutik RNase dina leyuran, hese pikeun urang ngadeteksi éta ku metodeu di luhur, tapi kalolobaan réaksi énzimatik anu salajengna dilaksanakeun di luhur 37 derajat sareng kanggo waktos anu lami.Ku cara kieu, lamun aya jumlah leutik pisan RNase dina leyuran RNA, lajeng bakal aya lingkungan pisan cocog jeung waktu pikeun maénkeun peran maranéhanana dina percobaan saterusna, sarta tangtu percobaan bakal tiis dina waktu ieu.Di handap ieu kami ngenalkeun metode anu tiasa mastikeun naha aya residual RNase dina solusi RNA.
 
3. Uji pelestarian panas
Numutkeun konsentrasi sampel, tarik dua 1000 ng RNA tina leyuran RNA tur nambahkeun kana 0,5 ml centrifuge tube, sarta suplement eta kalawan pH 7,0 Tris panyangga kana volume total 10 ul, lajeng ngégél cap tina tabung.Nempatkeun salah sahijina dina mandi cai suhu konstan dina 70 ° C sarta tetep haneut salila 1 jam.Bagian sanésna disimpen dina kulkas -20 ° C salami 1 jam.Lamun waktuna geus nepi, piceun dua sampel pikeun éléktroforésis.Saatos éléktroforésis réngsé, bandingkeun pita éléktroforétik tina dua.Upami pita tina dua konsisten atanapi henteu aya bédana anu signifikan (tangtosna, pitana ogé nyumponan kaayaan dina metode 2), éta hartosna henteu aya kontaminasi residual RNase dina larutan RNA, sareng kualitas RNA anu saé pisan.Sabalikna, lamun sampel inkubasi dina 70 ° C nembongkeun degradasi atra, éta nunjukkeun yén aya kontaminasi RNase dina leyuran RNA.
 
2 Métode ékspérimén jeung téhnik ékstraksi RNA
Masalah anu sering urang hadapi nalika ékstraksi RNA nyaéta: (1) ngahasilkeun RNA rendah;(2) RNA boga polusi uyah serius;(3) RNA boga polusi pangleyur organik serius;(4) degradasi sampel jeung masalah séjén
 
1. Umumna dipaké réagen ékstraksi RNA total
Métode guanidine isothiocyanate sareng metode Trizol mangrupikeun metode anu paling sering dianggo pikeun ékstraksi total RNA tina jaringan sato sareng sél sato.Ieu hususna cocog pikeun sampel leutik jeung jaringan nu utamana hésé nimba, kayaning ékstraksi total RNA tina kulit kelenci jeung jaringan konéktif sato;Sajaba ti éta, Trizol, salaku réagen lysis tujuan umum, ogé bisa dipaké pikeun ékstraksi jaringan tutuwuhan, baktéri, fungi jeung jaringan lianna.Pikeun jaringan tutuwuhan anu ngandung polisakarida sareng polifenol, sapertos camellia oleifera, daun tea, rapeseed, sareng sajabana, metode CTAB ogé tiasa dianggo pikeun nimba total RNA.

Salaku métode konvensional, métode kolom ganda ogé pohara populér alatan operasi suhu normal na, teu perlu nambahkeun RNase, sarta kaamanan-henteu kloroform, fénol jeung réagen organik séjén pikeun ékstraksi.(produk dianjurkeun )