Kit Isolasi Total RNA Tutuwuhan Kit Purificaiton RNA Total pikeun Tutuwuhan Rendah dina Polisakarida sareng Polifenol
spésifikasi
50 préparasi, 200 préparasi
Kit ngagunakeun kolom spin sareng rumus anu dikembangkeun ku Foregene, anu éfisién tiasa ékstrak RNA total murni sareng kualitas luhur tina sababaraha jaringan tutuwuhan kalayan eusi polisakarida sareng polifenol anu rendah.Pikeun sampel tutuwuhan anu ngandung polisakarida atawa polifenol anu luhur, disarankeun ngagunakeun Plant Total RNA Isolation Plus Kit pikeun meunangkeun hasil ékstraksi RNA anu hadé.Kit nyadiakeun kolom DNA-Cleaning nu bisa kalayan gampang miceun DNA génomik tina supernatant jeung jaringan lysate.Kolom RNA-hijina tiasa ngabeungkeut RNA sacara efektif.Kit tiasa ngolah sajumlah ageung conto dina waktos anu sami.
Sakabéh sistem teu ngandung RNase, jadi RNA dimurnikeun moal didegradasi.Panyangga PRW1 sareng Panyangga PRW2 tiasa mastikeun yén RNA anu dicandak henteu kacemar ku protéin, DNA, ion, sareng sanyawa organik.
komponén Kit
| panyangga PSL1, panyangga PS, panyangga PSL2 |
| Panyangga PRW1, Panyangga PRW2 |
| RNase-Free ddH2O, Kolom Pembersih DNA |
| RNA-Ngan Kolom |
| parentah |
Fitur & kauntungan
■ Operasi dina suhu kamar (15-25 ℃) sapanjang sakabeh proses, tanpa és mandi jeung hawa low centrifugation.
■ Kit lengkep RNase-Free, teu kedah hariwang ngeunaan degradasi RNA.
■ Kolom DNA-Beresih husus ngabeungkeut DNA, ku kituna kit nu bisa miceun kontaminasi DNA génomik tanpa nambahkeun DNase.
■ Ngahasilkeun RNA tinggi: RNA-hijina Kolom jeung rumus unik bisa éfisién purify RNA.
■ Laju gancang: gampang dioperasikeun sareng tiasa réngsé dina 30 menit.
■ Kasalametan: euweuh réagen organik diperlukeun.
■ kualitas luhur: fragmen RNA dimurnikeun téh tina purity tinggi, bébas tina protéin jeung pangotor séjén, sarta bisa minuhan sagala rupa aplikasi eksperimen hilir.
Aplikasi kit
Ieu cocog pikeun ékstraksi jeung purifikasi total RNA tina sampel jaringan tutuwuhan seger atawa beku (utamana jaringan daun tutuwuhan seger) kalawan polysaccharide low sarta eusi polifenol.
Aliran gawé
Diagram
Plant Total RNA Isolation Kit Plus ngolah 50mg daun seger polisakarida jeung polifenol, sarta 5% RNA dimurnikeun diuji ku éléktroforésis.
1: cau
2: Gingko
3: Kapas
4: dalima
Panyimpenan sareng umur rak
Kit tiasa disimpen salami 12 bulan dina suhu kamar (15-25 ℃) dina lingkungan garing, sareng 2-8 ℃ kanggo waktos anu langkung lami (24 bulan).
Panyangga PSL1 bisa disimpen dina 4 ℃ salila 1 bulan sanggeus nambahkeun 2-hidroksi-1-étanetiol (opsional).
Pituduh Analisis Masalah
Analisis di handap ieu ngeunaan masalah anu anjeun tiasa mendakanTutuwuhan TotalRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
Kolom spin mampet
Penyumbatan kolom spin bakal ngabalukarkeun ngahasilkeun RNA ngurangan atawa malah teu bisa dimurnikeun pikeun ménta RNA, sarta kualitas RNA diala bakal low.
Analisis sabab umum:
1. Sampel henteu pegat lengkep.
Fragméntasi sampel anu teu lengkep tiasa meungpeuk Kolom Ngabersihan DNA, anu ogé tiasa mangaruhan ngahasilkeun sareng kualitas RNA.Kami ngarékoméndasikeun yén nalika ngalakukeun fragméntasi sampel, gancang grind dina jumlah cukup nitrogén cair pikeun megatkeun up jaringan kayaning tembok sél jeung mémbran sél sampel saloba mungkin.Pikeun sampel tutuwuhan tina polisakarida polifenol, kami nyarankeun yén anjeun ngagunakeun Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2. Aspirate nu DNA-cleaning Column terasing supernatant, aspirate nu mungkin sél lebu pellet.
Pelet lebu sél anu disedot tiasa nyumbat Kolom RNA wungkul salami prosedur adsorpsi RNA (tingali léngkah 5 prosedur, léngkah 6 tina prosedur polifenol polisakarida).Kami nyarankeun yén ati-ati kedah dilaksanakeun nalika nyéépkeun supernatan ieu pikeun ngahindarkeun lebu sél disedot.
3. Jumlah awal sampel badag teuing.
Pamakéan sampel anu kaleuleuwihan bakal nyababkeun fragméntasi sampel anu teu lengkep atanapi lisis sél anu teu lengkep ku Buffer PRL1 atanapi Buffer PSL1, nyababkeun kolom purifikasi anu mampet pikeun operasi purifikasi.Tutuwuhan Total RNA Isolasi Kit boga maksimum awal 50 mg per purifikasi tunggal sampel dioperasikeun.Pikeun sampel tutuwuhan polisakarida polifenol, kami nyarankeun yén anjeun nyobian Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. Suhu centrifuge nu teuing low.
Isolasi sareng purifikasi RNA sadayana iwal gangguan nitrogén cair tina sampel jaringan, sadaya léngkah dilaksanakeun dina suhu kamar (20-25 °C).Sababaraha centrifuges suhu-rendah gaduh suhu sahandapeun 20 °C, anu tiasa nyababkeun sumbatan dina Kolom Ngabersihan DNA sareng/atanapi Kolom RNA wungkul.Upami ieu kajantenan, setel suhu centrifuge ka 20-25 °C sareng pre-haneutkeun campuran lisis sareng/atanapi tambihan supernatan pemisahan étanol ka 37 °C.
Henteu aya RNA anu diekstrak atanapi ngahasilkeun RNA rendah
Biasana aya seueur faktor anu mangaruhan efisiensi pamulihan, sapertos: eusi sampel RNA, metode operasi, volume élusi, jsb.
Analisis sabab umum saperti kieu:
1.An és mandi atawa hawa low (4 ° C) centrifugation ieu dipigawé salila operasi.
Saran: Beroperasi dina suhu kamar (15-25 ° C) dina sadaya prosés, ulah ngalakukeun mandi és sareng sentrifugasi suhu rendah.
2.RNA geus didegradasi alatan pelestarian salah sahiji sampel atawa pelestarian jangka panjang sampel.
Rekomendasi: sampel Freshly dikumpulkeun kudu gancang beku dina nitrogén cair, lajeng disimpen dina -80 ° C pikeun lila, ulah ngulang katirisan sarta thawing sampel;atawa geura soak sampel dina larutan RNA stabilizer RNAlater (sampel sato).
3.Fragméntasi sampel anu henteu cekap sareng lisis ngakibatkeun sumbatan kolom purifikasi.
Saran: Nalika ngagiling jaringan, punten pastikeun yén jaringanna cekap digiling, sareng gancang-gancang mindahkeun kana panyangga PSL1 anu tos disiapkeun (pastikeun yén proporsi β-ME anu leres parantos ditambah, tingali léngkah 1 tina prosedur).
4.Eluent ieu ditambahkeun salah.
Saran: Pastikeun yén RNase-Free ddH2O diteteskeun kana tengah mémbran kolom purifikasi.
5.Volume bener étanol mutlak teu ditambahkeun kana panyangga PSL2 atanapi panyangga PRW2.
Saran: Mangga turutan parentah, tambahkeun volume bener etanol mutlak ka panyangga PSL2 jeung panyangga PRW2 jeung mix ogé saméméh kit dipaké.
6.Jumlah sampel jaringan teu pantes.
Saran: Anggo 50 mg jaringan per 500 μl Buffer PSL1.Ngagunakeun teuing jaringan bakal ngurangan jumlah RNA sari jeung purity RNA hasilna ogé bakal ngurangan.Kami nyarankeun pisan yén dosis sampel awal henteu kedah langkung ti 50 mg per operasi ékstraksi RNA.
7. Volume élusi teu pantes atawa élusi teu lengkep.
Saran: Volume eluent kolom purifikasi nyaéta 50-200 μl;Upami pangaruh élusi henteu nyugemakeun, disarankeun pikeun manjangkeun waktos dina suhu kamar saatos nambihan ddH Bebas RNase anu dipanaskeun.2O, sapertos 5-10 mnt.
8.Kolom purifikasi boga résidu étanol sanggeus ngumbah kalawan panyangga PRW2.
Saran: Upami tabung kosong disentri pikeun 1 mnt sareng masih aya étanol sésana saatos dikumbah dina Panyangga PRW2, anjeun tiasa ningkatkeun waktos sentrifugasi tabung kosong ka 2 mnt, atanapi nempatkeun kolom purifikasi dina suhu kamar salami 5 mnt pikeun ngaleungitkeun étanol sésa.
9. kit ieu dipaké salah.
Saran: Pikeun sampel tutuwuhan polisakarida polifenolik, maké kit umum saperti Kit Isolasi RNA Total Tumbuhan bisa jadi teu bisa meunangkeun sampel RNA idéal.Kami ngarékoméndasikeun anjeun ngagunakeun Plant Total RNA IsolationKit Plus, anu dirarancang khusus pikeun sampel tutuwuhan polyphenolic polisakarida.Kit anu dikembangkeun khusus pikeun ékstrak RNA tina conto pepelakan polifenol sareng polisakarida.
OD260 / OD280 nilai low
Élusi RNA jeung ddH2O sarta dipaké pikeun maca spéktrofotométer ngahasilkeun nilai OD260/OD280 low.Kami nganjurkeun ngagunakeun 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (tinimbang RNase-Free ddH2O pikeun élute RNA) pikeun meunangkeun nilai OD260/OD280 anu rélatif bener, tingali "Konsentrasi RNA sareng Uji Purifikasi" dina kaca 19.
RNA dimurnikeun didegradasi
Kualitas RNA anu dimurnikeun aya hubunganana sareng faktor sapertos pelestarian sampel, kontaminasi RNase, sareng manipulasi.
Analisis sabab umum:
1.Tissue sampel teu disimpen dina waktu sanggeus ngumpulkeun.
Rekomendasi: Lamun sampel jaringan teu dipaké dina waktu sanggeus ngumpulkeun, mangga nyimpen eta dina nitrogén cair dina suhu low geuwat atawa mindahkeun ka -80 ° C pikeun neundeun jangka panjang sanggeus katirisan gancang dina nitrogén cair, atawa geuwat neuleumkeun sampel dina RNA stabilizer RNAlater solusi (sato sato).Pikeun ékstraksi RNA, coba ngagunakeun sampel jaringan anyar dikumpulkeun.
2.Repeated katirisan jeung thawing sampel jaringan.
Saran: Nalika nyimpen sampel jaringan, leuwih sae pikeun motong kana potongan-potongan leutik pikeun pelestarian, sarta nyandak kaluar bagian tina eta nalika dipaké pikeun nyegah degradasi RNA disababkeun ku katirisan terus-terusan sarta thawing tina sampel.
3. RNase diwanohkeun di kamar operasi atawa teu dipaké sarung disposable, masker, jsb.
Saran: Percobaan ékstraksi RNA anu pangalusna dipigawé dina operasi RNA misah, sarta tabel laboratorium kudu cleaned saméméh percobaan, sarta sarung disposable jeung masker kudu dipaké salila percobaan pikeun nyegah degradasi RNA disababkeun ku bubuka RNase ka extent greatest.
4.The réagen ieu kacemar ku RNase salila pamakéan.
Saran: Ganti ku séri anyar kit ékstraksi RNA total tutuwuhan pikeun percobaan anu aya hubunganana.
5.The tabung centrifuge na tips pipette dipaké pikeun manipulasi RNA anu kacemar ku RNase.
Saran: Pastikeun yén tabung centrifuge, tip pipette, pipettes, jsb dipaké dina ékstraksi RNA sadayana RNase-Free.
Instruksi Manual:
