bubuka:

RNA, ngaran ilmiah asam ribonukleat, singketan asalna tina RiboNucleic Acid, nyaéta sajenis asam nukléat anu dibentuk ku cara ngahubungkeun sakurang-kurangna puluhan ribonukleotida ngaliwatan beungkeut fosfodiester.

Premis pikeun ngajalajah RNA nyaéta ékstrak RNA Total anu bebas polusi, sareng prinsip dasar ékstraksi RNA tiasa diringkeskeun sacara kasar kieu:

1. Ngaganggu sél munggaran

2. Saterusna miceun kokotor makromolekul (protéin, lipid, DNA, jsb)

3. Tungtungna, RNA ieu endapan bari nyoplokkeun uyah jeung pangleyur organik, sarta salajengna ngamurnikeun RNA.

Baheula jeung ayeuna métode ékstraksi

Generasi kahiji métode ékstraksi RNA nyaéta métode présipitasi TRIzol (réagen dipaké kaasup guanidine isothiocyanate, fénol, kloroform, jsb) invented by a akina ngaranna Piotr Chomczynski jeung nini Nicoletta Sacchi, sabab penemuan ieu ngamungkinkeun ékstraksi RNA panalungtikan Gancang jeung gampang, saprak lajeng dimimitian upsurge of RNA.

Engké, Embah ngajual patén ieu ka Invitrogen, sareng Invitrogen ngamajukeun metode ieu ka dunya sareng janten metode anu seueur dianggo.

Engké, Invitrogen kaala ku Thermo!

Produk wawakil: réagen TRIzol Invitrogen urang

Sanajan kitu, métode présipitasi TRIzol merlukeun sababaraha présipitasi sarta ékstraksi RNA, sarta réagen dipaké téh toksik sarta butuh waktu lila pikeun beroperasi.

Ku alatan éta, metoda purifikasi kolom-énzim generasi kadua sumping kana mahluk, ngagunakeun mémbran gél silika salaku bahan adsorption asam nukléat husus pikeun maksimalkeun pungsi recovery RNA dina sampel bari nyoplokkeun pangotor lianna.

Metoda generasi kadua simplifies operasi dina dasar kinerja stabil, ngurangan faktor résiko, sarta ngaronjatkeun efisiensi ékstraksi RNA.

produk wawakil: QIAGEN RNeasy jeung paling produk domestik

Tapi, duanana métode generasi kahiji jeung kadua merlukeun pamakéan DNase pikeun miceun kontaminasi DNA, nu brings sababaraha kasulitan pikeun percobaan hilir saterusna.DNase sésa bakal ngurangan efisiensi transkripsi sabalikna sarta ngurangan sintésis cDNA-strand kahiji, kukituna mangaruhan akurasi hasil.

Ku alatan éta, métode ékstraksi generasi katilu dioptimalkeun dina dasar generasi kadua.Ékspérimén henteu kedah nambihan énzim, sareng RNA tiasa gampang dimeunangkeun ku ukur dua kolom.

Kolom 1: Kolom Pembersih DNA pikeun ngabersihan DNA

Kolom 2: RNA-hijina Kolom husus adsorbs jeung recovers RNA

Operasi saderhana sapertos kitu henteu ngan ukur ngahémat waktos, tapi ogé ngagampangkeun operasi percobaan hilir!

produk wawakil: QIAGEN RNeasy Ditambah jeungForegeneproduk runtuyan purifikasi RNA

(RNeasy Plus)

(Foregene urangKit Isolasi RNA Total Tumbuhan）

Nyaritakeun anjeun tenang!Kit RNA Foregene ogé nyayogikeun RNase Eraser anu gampang dianggo, anu tiasa ngaleungitkeun 400μg RNase dina permukaan padet dina 1 menit, tanpa nambihan zat toksik kana awak manusa!

Pic1: Bagan ngabandingkeun prosés operasional

Produk Foregene tiasa ngalengkepan ékstraksi RNA dina ngan ukur dua lagu, ulah ngajantenkeun batur sirik kana kamajuan ékspérimén anjeun!

Pic2:Ehasil xperimental grafik ngabandingkeun

Generasi kahiji (1: TRIzol)

Generasi kadua (2: RNeasy of QIAGEN)

Generasi katilu (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Pic3: Grafik qPCR (grafik kurva amplifikasi)

Generasi kahiji (héjo hartina TRIzol -, beureum hartina TRIzol +)

Generasi kadua (biru langit hartina QIAGEN RNeasy-, beureum hartina QIAGEN RNeasy +)

Generasi katilu (biru hartina QIAGEN RNeasy plus, héjo hartina Foregene)

(Catetan: grafik qPCR "-" nunjukkeun yén DNase teu acan ditambahkeun jeung kontaminasi DNA teu dihapus. Ku alatan éta, CT nu leuwih luhur sarta hasilna teu akurat; "+" nunjukkeun yén DNase geus ditambahkeun jeung kontaminasi DNA geus dihapus, hasilna akurat)

Unggal pamutahiran téknis hartosna yén operasi ékspérimén ngembang dina arah anu langkung saderhana sareng langkung ramah-pamaké.

Foregene boga tujuan pikeun mantuan panalungtik leuwih ilmiah ngahemat waktu jeung ongkos ékspérimén, ménta hasil ékspérimén kualitas luhur, sarta babarengan nyieun prestasi panalungtikan ilmiah leuwih berharga.