Naha anjeun masih ngagunakeun Trizol pikeun ékstrak RNA?
Gosh, ulah ngantep kuring salempang ngeunaan kaséhatan anjeun!
Trizol bakal dipinggirkan, tong ngawartosan anjeun masih poék?

Komponén utama réagen Trizol nyaéta fénol, sareng réagen organik sapertos kloroform ogé ditambahkeun dina operasi ékspérimén.Paparan jangka panjang bakal ngarugikeun kaséhatan Anjeun, utamana kontak kulit langsung bisa ngabalukarkeun kaduruk kimiawi parna sarta scars permanén.

Dina kaayaan normal, mitra laboratorium ngan ukur tiasa ngirangan bahya ku cara pinuh angkatan diri (ngagem jas lab, sarung tangan sareng masker).

Sareng naséhat kuring ka anjeun nyaéta: mangga ganti Trizol langsung pikeun ngahindarkeun cilaka tina sumberna.

1. Produk generasi kahiji ékstraksi RNA
Kaluar dina 1987 (réagen Trizol)

Kauntungannana:
ékstraksi leuwih lengkep

Kakurangan:
Réagen toksik sapertos guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform diperyogikeun;
Operasi pajeulit;
Perlu ngagunakeun DNase pikeun ngaleungitkeun kontaminasi DNA

2.Produk generasi kadua ékstraksi RNA
Kaluar dina 1994 (QIAGEN RNeasy sareng seueur produk domestik)

Kauntungannana:
Metodeu centrifugal kolom diadopsi, anu gampang dioperasikeun;

Kakurangan:
Perlu centrifuge pikeun miceun lebu jaringan
Perlu ngagunakeun DNase pikeun ngaleungitkeun kontaminasi DNA

3.Produk generasi katilu ékstraksi RNA
Kaluar dina 2005 (QIAGEN RNeasy Plus sareng Foregeneproduk runtuyan purifikasi RNA)

Kauntungannana:
Langsung nganggo kolom panyabutan DNA pikeun ngaleungitkeun DNA sareng lebu jaringan dina waktos anu sami, ngahémat waktos sareng usaha;
Aman sareng merenah, teu kedah nambihan kolom saringan sareng DNase pikeun gampang ngahapus pangotor sareng ngahindarkeun kontaminasi DNA

Hayu urang tingali béda operasional antara produk generasi kahiji (Trizol), produk generasi kadua (RNeasy) jeung produk generasi katilu (Foregene) ékstraksi RNA:

Operasi dina gambar jelas: produk generasi katilu boga kaunggulan atra

Ngan tilu kecap pikeun ngajelaskeun: gampang!Gancang!Kasalametan

Bagan PK tina hasil ékspériménpikeungenerasi kahiji, generasi kadua jeung generasi katilu produk ékstraksi RNA:

1. Elektroforetogram

Generasi kahiji (1: Trizol)
Generasi kadua (2: QIAGEN RNeasy)
Generasi katilu (3: QIAGEN RNeasy tambah, 4: Foregene)

Jenis produk anu saé, anjeun bakal terang ku ngabandingkeun
RNA diekstrak ngagunakeun kit Foregene
Henteu ngan konsentrasi luhur tapi ogé integritas alus

2. Grafik qPCR (grafik kurva amplifikasi)

Generasi kahiji (Trizol)

Generasi kadua (biru langithartinaQIAGEN RNeasy-, beureumhartinaQIAGEN Gampang +)

Generasi katilu (biru hartina Foregene, héjo hartina QIAGEN RNeasy tambah)

(Catetan: QIAGEN RNeasy generasi kadua grafik qPCR hartina kit nu teu nambahan DNase jeung teu ngaleungitkeun kontaminasi DNA. Ku alatan éta, CT nu leuwih luhur jeung hasilna teu akurat; QIAGEN RNeasy + hartina DNase geus ditambahkeun jeung kontaminasi DNA geus dihapus, sarta hasilna akurat)

Naha éta mangrupikeun éléktroforégram atanapi grafik kurva amplifikasi PCR kuantitatif, kualitas produk Foregene henteu langkung handap tina produk impor asing.