Analisis di handap ngeunaan kamungkinan masalah dinaBuccalngusap/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Kolom purifikasi tersumbat

Dina kit ieu, dina operasi ékstraksi DNA génomik, kolom purifikasi langsung adsorbed dina sampel campuran lysis énzimatik tanpa hambalan centrifugation, sarta kolom purifikasi bisa diblokir alatan énzimisasi lengkep jeung viskositas tinggi sampel.

Anu jadi sabab di handap ieu nyaéta saperti kieu:

1. Nyerna énzimatik teu lengkep sampel jaringan.

Rekomendasi: Waktu ngolah sampel Foregene Protease tiasa diperpanjang atanapi supernatan tiasa dicandak saatos sentrifugasi dina 12,000 rpm (~ 13,400).× g) salila 5 mnt.

2. Pamakéan kaleuleuwihan sampel jaringan atawa jaringan badag.

Rekomendasi: Hadé pisan mun éta henteu ngaleuwihan 1Buccal swab dina sampel;upami sampelna ageung teuing, ningkatkeun dosis panyangga ST1, Foregene Protease, panyangga ST2 sasuai.

3. The viskositas sampel teuing tinggi.

Rekomendasi: Sampel tiasa éncér kalayan 10 mM Tris-HCl sateuacan ékstraksi DNA génomik.

4. Sempalan kartu getih geus disedot.

Rekomendasi: Waktu centrifugation fana tina hambalan 6 titik getih (Kartu FTA) ékstraksi génomik bisa appropriately diperpanjang.

ngahasilkeun low atawa euweuh DNA

Sering aya rupa-rupa faktor anu mangaruhan ngahasilkeun DNA génomik, kaasup asal sampel, kaayaan gudang sampel, persiapan sampel, manipulasi, jsb.

DNA génomik teu bisa diala salila ékstraksi

Alesan anu mungkin nyaéta kieu:

1. Pelestarian sampel atawa neundeun teu bener pikeun lila teuing ngabalukarkeun degradasi DNA génomik.

Rekomendasi: swab lisan kedah preferably freshly sampel, sarta teu sasaena ngagunakeun swabs dilestarikan pikeun operasi ékstraksi DNA génomik;Sampel titik getih kedah mastikeun yén kualitasna mumpuni sareng waktos neundeun henteu kedah panjang teuing.

2. Saeutik teuing pamakéan jaringan bisa ngakibatkeun euweuh ékstraksi DNA génomik pakait.

Rekomendasi: Tuturkeunbuccal parentah sampling swab dina pituduh operasi, sarta usap saloba mungkin ku kituna cukup sél bisa napel swab lisan pikeun ékstraksi DNA génomik;pikeun ékstraksi sampel titik getih, wewengkon motong titik getih bisa appropriately ngaronjat.

3. Foregene Protease ieu improperly dilestarikan, hasilna panurunan dina aktivitas atawa inactivation na.

Rekomendasi: Konfirmasi kaayaan panyimpenan tinaanu Foregene Protease atawa ngaganti eta ku Foregene Protease anyar pikeun réaksi énzimatik.

4. Pelestarian teu bener tina kit atawa waktu neundeun panjang teuing, hasilna gagalna sababaraha komponén dina kit.

Rekomendasi: Meuli anyarBuccal DNA swabisolasi kit pikeun prosedur patali.

5. Panyangga WB henteu nambahan étanol mutlak.

Rekomendasi: Pastikeun yén panyangga WB nambihan volume étanol mutlak anu leres.

6. eluent teu bener ditambahkeun kana pilem silicone.

Rekomendasi: Tambahkeun 65°Celuent pre-warmed pakait ka tengah mémbran silicone sarta ninggalkeun dina suhu kamar pikeun 5 mnt pikeun ngaronjatkeun efisiensi élusi.

Low-ngahasilkeun DNA génomik terasing

Anu jadi sabab di handap ieu nyaéta saperti kieu:

1. Pelestarian sampel atawa neundeun teu bener pikeun lila teuing ngabalukarkeun degradasi DNA génomik.

Rekomendasi: Sapuan lisan langkung saé diconto énggal, sareng swab anu diawetkeun henteu kedah dianggo pikeun ékstraksi DNA génomik.

2. Lamun jumlah sampel jaringan teuing leutik, eusi DNA génomik sasari bakal kirang.

Rekomendasi: Turutan parentah sampling swab oral dina pituduh operasi, usap saloba kali mungkin ku kituna cukup sél bisa napel swab lisan pikeun ékstraksi DNA génomik.

3. Foregene Protease ieu improperly dilestarikan, hasilna panurunan dina aktivitas atawa inactivation na.

Rekomendasi: Konfirmasi kaayaan panyimpenan tinathe Foregene Protease atawa ngaganti eta ku nu anyar Foregene Protéase pikeun réaksi énzimatik.

4. Masalah eluent.

Rekomendasi: Paké panyangga EB pikeun élusi;lamun maké ddH₂O atawa eluent séjén, pastikeun yén pH eluate antara 7.0-8.5.

5. eluate teu bener ditambahkeun dropwise.

Rekomendasi: Tambahkeun tetes eluent ka tengah mémbran silikon sarta ninggalkeun dina suhu kamar pikeun 5 mnt pikeun ngaronjatkeun efisiensi élusi.

6. Cairan élusi accumulates teuing saeutik.

Rekomendasi: Paké eluent pikeun élusi DNA génomik sakumaha diperlukeun dina parentah, sahenteunateu kurang ti 15μl.

Laduh kasucian of DNA genomterasing

Purity DNA génomik low bisa ngakibatkeun kagagalan atawa hasil untisfactory tina percobaan hilir, kayaning: énzim teu bisa dipotong kabuka, PCR teu bisa meunangkeun fragmen gen dipikaresep, jsb.

Alesan anu mungkin nyaéta kieu:

1. polusi hétéroprotein, polusi RNA.

Analisis: Kolom purifikasi henteu dikumbah nganggo Buffer PW;kolom purifikasi nyeuseuh panyangga PW teu dikumbah maké speed centrifugal bener.

Rekomendasi: Pastikeun teu aya présipitasi dina supernatant saméméh nambahkeun étanol;pastikeun pikeun ngumbah kolom purifikasi nurutkeun parentah, sarta hambalan ieu teu bisa disingkahkeun.

2. polusi ion impurity.

Analisis: Kolom pemurnian cuci panyangga WB dileungitkeun atanapi dikumbah ngan sakali, nyababkeun kontaminasi ionik sésa.

Rekomendasi: Pastikeun pikeun ngumbah panyangga WB 2 kali sakumaha diarahkeun pikeun miceun residual ion saloba mungkin.

3. Kontaminasi énzim RNA.

Analisis: RNases asing ditambahkeun kana panyangga;Operasi cuci panyangga PW teu leres, nyababkeun résidu RNase, mangaruhan operasi ékspérimén RNA hilir, sapertos transkripsi in vitro.

Rekomendasi: asam nukléat runtuyan ForegeneisolaKit tiasa ngaleungitkeun RNA tanpa tambihan tambahan RNase,sahingga buccal Swab / FTA Card DNA Isolasi Kitperyogi't tambahkeun RNase;pastikeun turutan parentah pikeun panyangga PW cuci kolom purifikasi, jeung hambalan ieu teu bisa disingkahkeun.

4. Résidu étanol.

Analisis: panyangga WB teu ngalakukeun centrifugation tube kosong sanggeus ngumbah kolom purifikasi.

Rekomendasi: Ngalakukeun operasi centrifugation tube kosong bener nurutkeun parentah.

5. polusi najis séjén.

Analisis: Sampel anu disimpen atanapi conto khusus henteu dirawat sateuacana.

Rekomendasi: Tuntas pretreat sampel sakumaha maréntahkeun.