Netepkeun SOP percobaan PCR pikeun ngabakukeun paripolah tanaga percobaan.
The experimenter mastikeun abides ku prosedur operasi, sarta ngaminimalkeun polusi PCR nu bisa disababkeun ku faktor manusa atawa nyegah lumangsungna polusi.Salaku tambahan, ékspérimén kedah gaduh pangaweruh sareng kaahlian profésional anu saluyu, kalebet kamahéran dina ngoperasikeun alat-alat anu aya hubunganana, ngajelaskeun sadayana prosés kerja, ngawasaan metode pengobatan kontaminasi sareng metode kontrol kualitas laboratorium, sareng tiasa leres napsirkeun hasil tés.
Ngadegkeun laboratorium PCR standar.
Laboratorium PCR sacara prinsip dibagi kana opat wewengkon, nya éta wewengkon persiapan réagen, wewengkon ngolah sampel, wewengkon amplifikasi, jeung wewengkon analisis produk amplifikasi.Dua wewengkon munggaran nyaéta wewengkon pra-amplifikasi, sarta dua wewengkon panungtungan nyaéta wewengkon pos-amplifikasi.Zona pra-amplifikasi sareng zona pasca-amplifikasi kedah dipisahkeun sacara ketat.Bahan ékspérimén, réagen, kertas rékaman, pulpén, bahan beberesih, sareng sajabana, ngan ukur tiasa ngalir ti daérah pre-amplifikasi ka daérah pasca-amplifikasi, nyaéta, ti daérah persiapan réagen → daérah pamrosésan sampel → daérah amplifikasi → daérah analisis produk amplifikasi, sareng henteu kedah ngalir ka tukang .Aliran udara di laboratorium ogé kedah ngalir ti daérah pra-amplifikasi ka daérah pasca-amplifikasi, sareng henteu ngalir ka tukang.Desain laboratorium PCR anu idéal dipidangkeun di handap ieu:
Gambar A: Modeu pangaturan laboratorium PCR idéal kalayan tekanan négatip di kamar panyangga
Gambar B: Modeu pangaturan laboratorium PCR idéal kalayan tekanan positip dina rohangan panyangga
Diagram pangaturan laboratorium PCR anu dipasihkeun dina Gambar A sareng Gambar B kedah janten mode pangaturan anu langkung idéal, sareng laboratorium kalayan kaayaan tiasa ngarujuk kana mode ieu pikeun desain.Pikeun laboratorium biasa, disarankeun yén daérah amplifikasi PCR sareng daérah analisa produk tiasa dipisahkeun, sareng bukaan panutupna kedah dikirangan saloba mungkin di daérah persiapan sampel sareng daérah amplifikasi PCR.Émut: Produk sareng suplai ékspérimén di daérah analisis produk dilarang pisan dibawa ka daérah persiapan sampel sareng daérah amplifikasi PCR.
Upami laboratorium ngan ukur ngalakukeun deteksi sareng idéntifikasi PCR, disarankeun ngagunakeun PCR kuantitatif fluoresensi tibatan PCR konvensional.
Hasil deteksi PCR kuantitatif fluoresensi tiasa dikumpulkeun sareng dianalisis ku sinyal fluoresensi, janten henteu kedah muka tutup pikeun éléktroforésis saatos réaksi, anu ngahindarkeun kontaminasi produk PCR anu disababkeun ku bocorna produk réaksi pikeun ngabentuk aerosol.Upami anjeun ningkatkeun jumlah bukaan tutup salami léngkah ngamuat éléktroforésis gél, kontaminasi aerosol kamungkinan kajantenan.Disarankeun pikeun ngamajukeun aplikasi PCR kuantitatif sareng laun-laun ngagentos PCR kualitatif.
Sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG dianggo pikeun réaksi PCR.
Sistim ngagunakeun dUTP tinimbang dTTP.Saatos réaksi PCR, sadaya produk PCR (fragmén DNA) diasupkeun sareng dUTP;dina babak salajengna réaksi PCR, énzim UNG ditambahkeun kana sistem ieu inkubasi dina 37 ° C salila 5 menit saméméh PCR, nu husus bisa nguraikeun sakabéh fragmen DNA nu ngandung dUTP, lajeng ngalakukeun réaksi PCR.Ieu tiasa ngaleungitkeun kontaminasi aerosol anu disababkeun ku produk PCR.Pangaruhna dipidangkeun dina gambar di handap ieu:
Catetan: Pikeun séri PCR langsung, anjeun tiasa milih produk séri sistem kontaminasi produk anti-PCR Foregene.Ngasongkeun
Pikeun laboratorium anu ngalaksanakeun tés genotyping skala ageung, disarankeun pisan ngagunakeun sistem kontaminasi produk anti-PCR UNG pikeun nguji réagen salian ti pangwangunan laboratorium anu lumrah.
Pangeling-eling: Pamakéan sistem ieu teu tiasa ngaleungitkeun kontaminasi produk PCR anu parantos disababkeun.Ku alatan éta, sistem UNG kudu dipaké dina awal test relevan, sarta sistem UNG kudu dipaké pikeun amplifikasi PCR, ku kituna pikeun nyegah kontaminasi produk PCR positif Palsu.
Disarankeun ngagunakeun sistem Direct PCR-UNG of Foregene nalika ngalaksanakeun tés skala ageung, sapertos:
Kit PCR Langsung Daun Tutuwuhan-UNG；
Kit PCR Langsung Bibit Tutuwuhan-UNG；
Tissue Sato Langsung PCR Kit-UNG；
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Ieu runtuyan kit ti Foregeneteu ngan bisa ngalakukeun deteksi PCR gancang sarta dina skala badag, tapi ogé éféktif nyegah sarta ngadalikeun kontaminasi produk PCR.
waktos pos: Mar-19-2021
