Sabaraha anjeun terang

Ngeunaan Nékstraksi asam ukleat

Awal jeung ahir asam nukléat dimurnikeun

Sagalana hese di awal, asam nukléat dimurnikeun téh paling

Inisiasi percobaan molekular, pikeun percobaan salajengna

Kasuksésan atawa kagagalan boga dampak krusial.

Trace/ultra-trace UV spectrophotometer disukai ku seueur peneliti ilmiah sabab tiasa ngadeteksi konsentrasi asam nukléat sareng protéin sareng résidu ion uyah sacara sederhana, gancang sareng ékonomis.

Sakumaha urang terang, A260 hartina nilai OD absorbance asam nukléat, A280 hartina nilai OD absorbance konsentrasi protéin, A230 hartina nilai OD absorbance konsentrasi ion uyah, jadi A260 bisa ngarobah konsentrasi asam nukléat, A260/280 hartina résidu protéin, A260/230 hartina résidu ion uyah, tapi ieu téh ukur hasil tina ukuran résidu ion uyah, tapi ku panalungtik ieu ngan ukur dumasar kana sababaraha aturan.konvensional” pikeun yakin yén éta bisa ngajelaskeun purity DNA jeung RNA kaextent tangtu.Ieu teu hijina standar pikeun idéntifikasi ngahasilkeun asam nukléat jeung purity, ngan dipaké salaku rujukan, sarta lain "standar emas".

Manual Thermo Fisher ND-2000 nekenkeun reliabilitas hasil tés

Alesanna nyaéta yén hasil anu diala ku ngagunakeun spéktrofotométer UV mikro/ultramikro ngan ukur ngagambarkeun ngahasilkeun sareng kamurnian asam nukléat ti sisi, sareng aya seueur faktor anu mangaruhan (jalur optik, volume sampel, konsentrasi sampel, nilai pH, ion sanés anu mangaruhan pangukuran absorbance, jsb.), nilai OD anu diukur henteu merta akurat.Dina waktu nu sarua, alatan kurangna spésifisitas bahan penentuan nilai absorbance, single-stranded DNA, ganda-stranded DNA, RNA, dNTPs, sarta sababaraha protéin sadayana gaduh puncak nyerep dina panjang gelombang 260nm, sarta konsentrasi ditangtukeun ku A260 nyalira teu merta DNA nyata atawa RNA.Konsentrasi, sareng integritas sareng degradasina teu tiasa ditaksir.

Janten kumaha carana nangtoskeun kualitas asam nukléat anu dimurnikeun?Salian ngagunakeun spéktrofotométer UV mikro/ultramikro pikeun deteksi, métode sapertos éléktroforésis gél agarose ogé diwajibkeun pikeun ningalikeun sacara visual kamurnian sareng integritas asam nukléat, sareng nunjukkeun konséntrasi dina tingkat anu tangtu.Ku cara kieu, ngahasilkeun asam nukléat sareng kamurnian anu dicandak tina hasil deteksi rupa-rupa metode tiasa dipercaya.

Perbandingan grafik ékspérimén

DNA génomik sél H1299 diekstrak nganggo kit Ekstraksi DNA perusahaan A, sareng kontaminasi najis anu signifikan katingali, nyababkeun nilai OD anu luhur.

(Nilai pangukuran OD sareng electropherogram saluyu)

Indéks évaluasi

Naha aya "standar emas" pikeun ngahasilkeun asam nukléat sareng uji kualitas?

Sajauh kami terang, teu aya metode anu sederhana, gancang sareng murah.Naha éta spéktrofotométer, éléktroforésis gél, atanapi spéktrométri massa, aranjeunna sadayana ngagambarkeun konsentrasi sareng kamurnian asam nukléat dina leyuran tina aspék anu béda, sareng aranjeunna kedah ditilik ku silih ngarujuk.

Indéks evaluasi pangalusna salawasnaaplikasi percobaan salajengna.Éta henteu mangaruhan efisiensi transkripsi sabalikna sareng amplifikasi PCR.Kéngingkeun produk amplifikasi anu dipercaya sareng nilai Ct, sareng kéngingkeun sekuen lengkep ku sequencing mangrupikeun ékstraksi asam nukléat anu suksés.

Pikeun nyimpulkeun, pandangan téori rasio-hijina kedah ditantang ku pandangan "ngagunakeun hasil ékspérimén hilir anu saé salaku parameter ékstraksi anu saé"!

Kit ékstraksi RNA DNA Foregene anu disarankeun pikeun kéngingkeun kamurnian DNA/RNA anu luhur:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/