Métode PCR sareng kontaminasi aerosol asam nukléat di laboratorium tés asam nukléat sapertos dua sisi koin.Urang ngan bisa milih boga atawa henteu, tapi urang teu bisa milih naha urang hayang atawa méakkeun eta.

1. Screening of DNA remover

Pikeun ngahontal panyabutan spasial tina kontaminasi aerosol asam nukléat, éta mimitina diperlukeun pikeun screen kaluar removers DNA nu bisa miceun asam nukléat dina kaayaan cair.Kusabab aya teu loba removers DNA nu bener jalan.Pikeun metode ékspérimén, mangga tingal: Panghapus DNA teu tiasa janten "sudut rusiah" laboratorium!

Dina percobaan ieu, 100 salinan / μL (CT kira 31) plasmid ASFV jeung DNA remover diitung ku PCR digital dicampurkeun dina volume sarua, lajeng diréaksikeun dina suhu kamar pikeun 10min, 20min jeung 30min mungguh.Saatos ékstraksi asam nukléat, amplifikasi qPCR dilaksanakeun.A kontrol positif dicampur plasmid jeung cai ieu dibandingkeun.Kusabab percobaan teu réngsé dina waktos anu sareng, meureun aya simpangan tangtu antara hasil, tapi teu mangaruhan kacindekan tina percobaan.Sajauh ieu, kuring parantos ngevaluasi 10 produk penghapus DNA komérsial.Ngan No 1, No 6 jeung No 8 produk bisa éféktif nguraikeun DNA plasmid dina kaayaan cair.produk lianna ampir euweuh pangaruh.

Tabél 1 Pangaruh panyabutan asam nukléat tina panghapus DNA anu sayogi komersil

2. Percobaan éfék panyabutan DNA tina disinféktan ilahar dipaké

1. Screening of disinféktan ilahar dipaké

Aya seueur jinis disinféktan anu biasa dianggo di laboratorium: aldehida, fénol, alkohol, uyah amonium kuartener, péroksida, persiapan klorin, sareng asam sareng basa.Balukar disinféksi disinféktan ieu dina mikroorganisme parantos diverifikasi ku ékspérimén, tapi henteu aya data ékspérimén anu cekap ngeunaan pangaruh degradasi asam nukléat.Laboratorium uji asam nukléat peryogi disinféktan anu henteu ngan ukur gaduh pangaruh disinfeksi anu hadé dina mikroorganisme, tapi ogé tiasa ngaréduksi DNA.Hasil tés nunjukkeun yén ngan ukur dua persiapan klorin tina 84 disinféktan sareng asam trichloroisocyanuric sareng asam hidroklorat 1 M nyumponan sarat.Kusabab asam hidroklorat 1 M kacida korosif, disarankeun yén persiapan klorin dianggo salaku pembuangan runtah di laboratorium tés asam nukléat.Tapi, persiapan klorin korosif kana logam sareng henteu tiasa dianggo pikeun disinfeksi alat sareng alat.

Tabél 2 Épék panyabutan DNA tina sababaraha jinis disinféktan

2. Konsentrasi éféktif minimum olahan klorin

Disinféktan basis klorin boga pangaruh degradasi DNA kuat, tapi alatan corrosiveness logam maranéhanana sarta iritasi, aranjeunna bisa dipaké pikeun ngabersihan lantai, countertops non-logam, tips soaking, tabung centrifuge jeung item tés lianna.

Nurutkeun kana "New Coronary Pneumonia Epidemic Disinfection Téknis Pedoman": Polutan (getih pasien, sékrési jeung utah) sadia klorin 5g/L-10g/L klorin-ngandung disinféktan;floors, tembok, jeung surfaces objék ngagunakeun klorin sadia 1g/L Disinféktan klorin: baju, parabot keur sare jeung tékstil séjén anu munggaran soaked dina disinféktan klorin kalawan 0,5g/L klorin sadia pikeun 30 menit, lajeng cleaned sakumaha biasa.

Tabél 3 Pangaruh panyabutan DNA tina béda konsentrasi disinféktan klorin

Hasil tés nunjukkeun yén: nalika konsentrasi klorin anu épéktip langkung ageung atanapi sami sareng 1,2 g / L, disinféktan anu ngandung klorin tiasa ngaréduksi lengkep 100 salinan / μL plasmid nalika dianggo salami 5 menit.Nalika ngalaksanakeun 10 menit, 84 disinféktan kalayan konsentrasi klorin anu épéktip langkung ageung atanapi sami sareng 0,6 g / L tiasa ngaréduksi lengkep 100 salinan / μL plasmid.

3. Percobaan panyabutan hawa kacemar ku aerosol asam nukléat

Kumaha ngabersihan hawa anu kacemar ku aerosol asam nukléat?Kaseueuran pikiran nyaéta nyiptakeun lingkungan anu kacemar aerosol teras ngabersihkeunana, atanapi ngabersihkeun asam nukléat saatos kontaminasi.Pikeun kuring, percobaan anu henteu tiasa diulang sareng hasil percobaan henteu tiasa dianalisis sacara kuantitatif henteu aya artina, janten kuring nginjeum sababaraha metode disinfeksi hawa disinféktan.Tingali "GB27948-2020 Syarat Umum pikeun Disinféktan Udara" sareng "Spésifikasi Téknis Disinfeksi"

1. Bahan tés

1.1 Panghapus DNA: Dina percobaan ieu, dua panghapus DNA sadia komersil 6 jeung 8 dina Table 1 dipilih.

1.2 Uji plasmid: Nganggap yén nilai CT kalolobaan polusi laboratorium bakal langkung luhur tibatan 30, konsentrasi plasmid gén ASFV anu dianggo ayeuna sakitar 100 salinan / μL, sareng PCR CT kuantitatif fluoresensi sakitar 31.07.Tambahkeun plasmid kana swab kapas flocking jeung hawa garing.

1.3 Alat uji: Alat disinfeksi Bilingkehan KVBOX, anu dirojong ku Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., gaduh prestasi disinfeksi hawa anu saé kalayan disinféktan hidrogén péroxida, sareng sacara efektif tiasa maéhan spora sareng mikroorganisme sanés.

1.4 rohangan Test: jandela mindahkeun katutup ngeunaan 0.1 méter kubik.

2. Métode tés

Jumlah disinféktan disetél dina mesin disinféktan nyaéta 10ml, sareng konsentrasina 100ml / m3, anu langkung luhur tibatan "GB27948-2020 Syarat Umum pikeun Disinféktan Udara": nalika nganggo disinféktan semprot aerosol, jumlah disinféktan kedahna ≤10 ml / m3