Pabrikan Cina pikeun 2 × Konsentrasi Premix pikeun Sampel Unpurified Real-Time Kuantitatif PCR Langsung Multiplex Probe Qpcr Campur Ditambah U
Organisasi tetep dina konsép prosedur "manajemén ilmiah, kualitas luhur jeung efisiensi primacy, purchaser pangluhurna pikeun Cina Produsén pikeun 2 × Konsentrasi Premix pikeun Unpurified Sampel Real-Time kuantitatif PCR langsung Multiplex Probe Qpcr Campur Ditambah U, bisnis urang dedicated ka méré konsumén jeung produk kualitas luhur signifikan jeung aman dina harga agrésif, sahingga unggal customer pleased.
Organisasi tetep dina konsép prosedur "manajemén ilmiah, kualitas luhur sareng kaunggulan efisiensi, pembeli pangluhurna pikeunCina Taq DNA Polimérase sareng Qpcr, Perusahaan kami gaduh kakuatan anu seueur sareng gaduh sistem jaringan penjualan anu stabil sareng sampurna.Kami ngarepkeun urang tiasa ngadamel hubungan bisnis anu saé sareng sadaya palanggan ti bumi sareng luar negeri dumasar kana kauntungan anu sami.
Prinsip desain primer PCR Waktu Nyata
Maju Primer jeung Reverse Primer
Pikeun Real Time PCR, desain primer penting pisan.Primer aya hubunganana sareng spésifisitas sareng efisiensi amplifikasi PCR, sareng tiasa dirarancang kalayan ngarujuk kana prinsip-prinsip ieu:
- Panjang Primer: 18-30bp.
- eusi GC: 40-60%.
- Nilai Tm: Parangkat lunak desain Primer, sapertos Primer 5, tiasa masihan nilai Tm tina primer.Nilai Tm primer hulu jeung hilir kudu sacaket mungkin.Rumus itungan Tm ogé bisa dipaké: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Nalika ngalakukeun PCR, suhu sahandapeun nilai Tm primer 5 °C umumna dipilih salaku suhu annealing (kenaikan suhu annealing anu saluyu tiasa ningkatkeun spésifisitas réaksi PCR).
- Primer sareng produk PCR:
- Desain Primer PCR amplifikasi panjang produk preferably 100-150bp.
- Primer desain di wewengkon struktural sekundér template kudu dihindari saloba mungkin.
- Hindarkeun formasi 2 atawa leuwih basa pelengkap antara 3' tungtung hulu jeung hilir primers.
- Primer 3' base terminal teu bisa hadir kalawan 3 tambahan berturut-turut G atawa C.
- Primer sorangan henteu tiasa gaduh struktur pelengkap, upami henteu, struktur jepit rambut bakal kabentuk, mangaruhan amplifikasi PCR.
- ATCG kedah disebarkeun sacara merata dina urutan primer, sareng pangkalan terminal 3′ kedah dihindari salaku T.
lampiran1: Cell LangsungRT-qPCR Komponén kitt suplement pak
1.Sél Leyuran Lysis
Leyuran Lysis sél | |||
komponén Kit (Sistem lisis 24 sumur / sumur) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Bagianabdi | Panyangga CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protéase Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Panyangga ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BagianII | Panghapus DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Campur | |
komponén Kit (Sistem réaksi 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × langsung RT Campur | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Campur | ||
komponén Kit (Sistem réaksi 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Langsung qPCR Campur-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × ROX Rujukan Dye | 40 ul | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Organisasi tetep dina konsép prosedur "manajemén ilmiah, kualitas luhur jeung efisiensi primacy, purchaser pangluhurna pikeun Cina Produsén pikeun 2 × Konsentrasi Premix pikeun Unpurified Sampel Real-Time kuantitatif PCR langsung Multiplex Probe Qpcr Campur Ditambah U, bisnis urang dedicated ka méré konsumén jeung produk kualitas luhur signifikan jeung aman dina harga agrésif, sahingga unggal customer pleased.
Cina Produsén pikeunCina Taq DNA Polimérase sareng Qpcr, Perusahaan kami gaduh kakuatan anu seueur sareng gaduh sistem jaringan penjualan anu stabil sareng sampurna.Kami ngarepkeun urang tiasa ngadamel hubungan bisnis anu saé sareng sadaya palanggan ti bumi sareng luar negeri dumasar kana kauntungan anu sami.
Prinsip desain primer PCR Waktu Nyata
Maju Primer jeung Reverse Primer
Pikeun Real Time PCR, desain primer penting pisan.Primer aya hubunganana sareng spésifisitas sareng efisiensi amplifikasi PCR, sareng tiasa dirarancang kalayan ngarujuk kana prinsip-prinsip ieu:
- Panjang Primer: 18-30bp.
- eusi GC: 40-60%.
- Nilai Tm: Parangkat lunak desain Primer, sapertos Primer 5, tiasa masihan nilai Tm tina primer.Nilai Tm primer hulu jeung hilir kudu sacaket mungkin.Rumus itungan Tm ogé bisa dipaké: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Nalika ngalakukeun PCR, suhu sahandapeun nilai Tm primer 5 °C umumna dipilih salaku suhu annealing (kenaikan suhu annealing anu saluyu tiasa ningkatkeun spésifisitas réaksi PCR).
- Primer sareng produk PCR:
- Desain Primer PCR amplifikasi panjang produk preferably 100-150bp.
- Primer desain di wewengkon struktural sekundér template kudu dihindari saloba mungkin.
- Hindarkeun formasi 2 atawa leuwih basa pelengkap antara 3' tungtung hulu jeung hilir primers.
- Primer 3' base terminal teu bisa hadir kalawan 3 tambahan berturut-turut G atawa C.
- Primer sorangan henteu tiasa gaduh struktur pelengkap, upami henteu, struktur jepit rambut bakal kabentuk, mangaruhan amplifikasi PCR.
- ATCG kedah disebarkeun sacara merata dina urutan primer, sareng pangkalan terminal 3′ kedah dihindari salaku T.
lampiran1: Cell LangsungRT-qPCR Komponén kitt suplement pak
1.Sél Leyuran Lysis
Leyuran Lysis sél | |||
komponén Kit (Sistem lisis 24 sumur / sumur) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Bagianabdi | Panyangga CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protéase Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Panyangga ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BagianII | Panghapus DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Campur | |
komponén Kit (Sistem réaksi 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × langsung RT Campur | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Campur | ||
komponén Kit (Sistem réaksi 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Langsung qPCR Campur-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × ROX Rujukan Dye | 40 ul | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Instruksi Manual: