Babandingan low A260 / A230 biasana disababkeun ku pangotor kalayan panjang gelombang nyerep maksimum dina 230nm.Hayu urang tingali naon najis ieu ngawengku:

• polutan umum	Panjang gelombang nyerep	Pangaruh rasio
  Protéin	~ 230nm sareng 280nm	Pangurangan sakaligus tina A260/A 280jeung A260/A 280babandingan
  uyah Guanidine	220-240 nm	Ngurangan A260/A 280babandingan
  Pénol	~270nm	-
  Trizol	~ 230nm sareng 270nm	Ngurangan A260/A 280babandingan
  EDTA	~230nm	Ngurangan A260/A 280babandingan
  Étanol	230-240 nm	Ngurangan A260/A 280babandingan

 
 
 
Panjang gelombang nyerep sareng nilai kontras polutan umum

Pkontaminasi rotéin
Polusi protéin bisa dianggap salaku polusi paling umum dina prosés ékstraksi asam nukléat.Protéin aya antara fase cai luhur jeung fase handaporganikfase .Polusi bakal ngurangan rasio A260 / A280 jeung A260 / A230 dina waktos anu sareng, sarta rasio A260 / A230 bakal robah leuwih écés ti rasio A260 / A280.
Dina mangsa saterusnatranskripsi sabaliknaor réaksi qPCR, résidu protéin bisa ngahambat atawa ngaganggu fungsi énzim.Cara anu pangsaéna pikeun ngahindarkeun kontaminasi protéin nyaéta pikeun ngémutan prinsip "rada kirang ti langkung, jumlah sakedik sababaraha kali" nalika nyéépkeun supernatan.

2. polusi Guanidinium
hydrochloride (GuHCl) jeung guanidine thiocyanate (GTC) boga pangaruh denaturasi protéin, nu bisa gancang ngancurkeun mémbran sél salila prosés ékstraksi asam nukléat, ngabalukarkeun denaturasi protéin jeung présipitasi.Panjang gelombang nyerep GuHCl sareng GTC antara 220-240 nm, sarengsésa uyah guanidinium bakal ngurangan rasio A260 / A230.Sanajan sésa uyah guanidinium bakal ngurangan rasio,dampak dina percobaan hilir sabenerna negligible.

3. kontaminasi Trizol
Komponén utama Trizol nyaéta fénol.Fungsi utama fénol nyaéta pikeun ngalis sél sareng ngaleupaskeun protéin sareng zat asam nukléat dina sél.Sanajan fénol sacara éféktif bisa ngadénaturasi protéin, éta teu bisa sagemblengna ngahambat aktivitas RNase.Ku alatan éta, 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, jsb ditambahkeun kana TRIzol pikeun ngahambat endogenous na exogenous RNase.
Nalika ékstraksi RNA sélular, Trizol tiasa gancang ngalis sél sareng ngahambat nukléase dileupaskeun tina sél, sareng sésa Trizol sacara signifikan bakal ngirangan rasio A260/A230.
Métode ngolah: Nalika centrifuging, éta kudu dicatet yén fénol dina Trizol gampang leyur dina fase cai dina kaayaan 4 ° jeung suhu kamar.

4. Résidu étanol
Étanol dipaké dina prosés ahir pikeun endapanana DNA bari ngabubarkeun ion uyah nu bisa kabeungkeut DNA.Panjang gelombang nyerep pangluhurnapuncak nyerep tinaétanol ogé aya dina 230-240 nm, anuogé bakal ngurangan rasio A260 / A230.
Métode pikeun ngahindarkeun résidu étanol bisa diulang dua kali salila élusi ahir, niupan dinatiung haseupsalila dua menit pikeun ngidinan étanol pinuh menguap saméméh nambahkeun panyangga pikeun élusi.
Nanging, kedah dipikanyaho yén rasio éta ngan ukur indéks évaluasi kualitas RNA.Upami operasi anu disebatkeun di luhur diatur sacara ketat, simpangan antara rasio sareng rentang standar moal gaduh dampak anu ageung dina percobaan hilir.
Produk patali:
Kit Isolasi RNA Total Sato
Kit Isolasi RNA Total tutuwuhan
Sél Total RNA Isolasi kit
Tutuwuhan Total RNA Isolasi kit Ditambah