Kit Isolasi RNA Total Tumbuhan Ditambah Kit Purificaiton RNA Total pikeun Tutuwuhan Beunghar Polisakarida sareng Polifenol
Katerangan Kit:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
Pikeun purifikasi total RNA tina sampel tutuwuhan umum ngandung polisakarida tinggi jeung komponén polifenol.
Gancang ékstrak RNA total kualitas luhur tina sampel tutuwuhan kalayan eusi tinggi polisakarida jeung polifenol.
RNase-Free Ngagunakeun Kolom Ngabersihan DNA
Basajan-sadaya operasi réngsé dina suhu kamar
Gancang-operasi tiasa réngsé dina 30 menit
Aman-henteu aya réagen organik anu dianggo 
spésifikasi
50 préparasi, 200 préparasi
Kit éta ngagunakeun kolom spin sareng rumus anu dikembangkeun ku Foregene, anu éfisién tiasa ékstrak RNA total murni sareng kualitas luhur tina sababaraha jaringan tutuwuhan kalayan eusi polisakarida atanapi polifenol anu luhur.Eta nyadiakeun kolom DNA-Beresih nu bisa kalayan gampang miceun DNA génomik tina supernatant jeung jaringan lysate.Kolom RNA-hijina tiasa ngabeungkeut RNA sacara efektif.Kit tiasa ngolah sajumlah ageung conto dina waktos anu sami.
Sakabéh sistem teu ngandung RNase, jadi RNA dimurnikeun moal didegradasi.Panyangga PRW1 sareng Panyangga PRW2 tiasa mastikeun yén RNA anu dicandak henteu kacemar ku protéin, DNA, ion, sareng sanyawa organik.
komponén Kit
| panyangga PSL1, panyangga PS, panyangga PSL2 |
| Panyangga PRW1, Panyangga PRW2 |
| RNase-Free ddH2O, Kolom Pembersih DNA |
| RNA-Ngan Kolom |
Fitur & kauntungan
■ Operasi dina suhu kamar (15-25 ℃) sapanjang sakabeh proses, tanpa és mandi jeung hawa low centrifugation.
■ Kit lengkep RNase-Free, teu kedah hariwang ngeunaan degradasi RNA.
■ Utamana cocog pikeun purifikasi RNA tina sampel tutuwuhan polisakarida jeung polifenol.
■ Kolom DNA-Beresih husus ngabeungkeut DNA, ku kituna kit nu bisa miceun kontaminasi DNA génomik tanpa nambahkeun DNase.
■ Ngahasilkeun RNA tinggi: RNA-hijina Kolom jeung rumus unik bisa éfisién purify RNA.
■ Laju gancang: gampang dioperasikeun sareng tiasa réngsé dina 30 menit.
■ Kasalametan: euweuh réagen organik diperlukeun.
■ kualitas luhur: fragmen RNA dimurnikeun téh tina purity tinggi, bébas tina protéin jeung pangotor séjén, sarta bisa minuhan sagala rupa aplikasi eksperimen hilir.
Parameter produk
■ Aplikasi hilir: sintésis cDNA first-strand, RT-PCR, kloning molekular, Northern Blot, jsb.
■ Sampel: Jaringan tutuwuhan seger atawa beku tina polisakarida jeung polifenol
■ Dosis: 50mg jaringan tutuwuhan
■ Kapasitas ngariung RNA maksimum kolom purifikasi: 80 μg
■ Volume élusi: 50-200 μl
Aplikasi kit
Ieu cocog pikeun ékstraksi jeung purifikasi total RNA tina sampel jaringan tutuwuhan seger atawa beku (utamana jaringan daun tutuwuhan seger) kalawan polysaccharide tinggi na kandungan polifenol.
Aliran gawé
Diagram
Plant Total RNA Isolation Kit Plus ngolah 50mg daun seger polisakarida jeung polifenol, sarta 5% RNA dimurnikeun diuji ku éléktroforésis.
1: cau
2: Gingko
3: Kapas
4: dalima
Panyimpenan sarta hirup rak
Kit ieu tiasa disimpen salami 24 bulan dina kaayaan garing dina suhu kamar (15-25 ℃);lamun perlu disimpen pikeun lila, éta bisa disimpen dina 2-8 ℃.
Panyangga PSL1 bisa ditempatkeun dina 4 ℃ salila 1 bulan sanggeus nambahkeun β-mercaptoethanol (disarankeun pikeun nambahkeun eta dina waktu nu sarua percobaan).
Kolom dipasang
Saatos kolom dipasang, ngahasilkeun RNA diréduksi atanapi bahkan teu mungkin pikeun ngamurnikeun RNA, sareng massa RNA anu diala rendah.
Analisis sabab umum:
1. Sampel putus teu tuntas.
Pegatna sampel henteu sagemblengna ngabalukarkeun KOLOM PEMBERSIH DNA diblokir, bari mangaruhan ngahasilkeun jeung kualitas RNA.Kami ngarékoméndasikeun operasi grinding gancang dina nitrogén cair cukup mun anjeun peupeus sampel, Coba mun naksir témbok sél sampel, mémbran sél jeung jaringan lianna.Pikeun sampel tutuwuhan tina polyol polysaccharides, kami nyarankeun yén anjeun ngagunakeun Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
2. Nalika nyeuseup supernatan sampel anu dipisahkeun sareng Kolom Pembersih DNA, kamungkinan endapan anu terfragmentasi sél tiasa kaseuseup.
Sédimén fragméntasi sél anu dicandak bakal nyababkeun Kolom RNA-ONLY anu bakal diblokir nalika operasi adsorpsi RNA dilaksanakeun (tingali lengkah 6).Kami ngarékoméndasikeun anjeun taliti nalika nyeuseup supernatan ieu pikeun nyegah lebu sél disedot.
3. Sampel jumlah awal teuing.
Pamakéan sampel kaleuleuwihan bakal ngakibatkeun fragméntasi sampel teu lengkep atanapi lisis sél teu lengkep ku Buffer PSL1, hasilna sumbatan kolom purifikasi salila purifikasi.Tutuwuhan Total RNA Isolasi Kit Unggal sampel operasi dimurnikeun tunggal 50 mg.Pikeun sampel tutuwuhan poliol polisakarida, kami nyarankeun yén anjeun coba Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
4. Suhu centrifuge nu teuing low.
Sakabéh prosés isolasi sareng purifikasi RNA dilaksanakeun dina suhu kamar (20-25°C), iwal jaringan sampel rusak ku nitrogen cair. Suhu sababaraha centrifuges cryogenic leuwih handap 20℃, nu bisa ngabalukarkeun sumbatan Kolom Ngabersihan DNA jeung/atawa Kolom Ngan RNA.Upami ieu kajantenan, setel suhu centrifuge ka 20-25℃, jeungpastikeun campuran lisis jeung/atawa supernatant ditambahkeun étanol dipanaskeun nepi ka 37°C.
Henteu aya RNA anu diekstrak atanapi ngahasilkeun RNA rendah
Biasana aya seueur faktor anu mangaruhan efisiensi pamulihan, sapertos: eusi sampel RNA, metode operasi, volume élusi, jsb.
Analisis sabab umum saperti kieu:
1.An és mandi atawa hawa low (4 ° C) centrifugation ieu dipigawé salila operasi.
Saran: Operasi dina suhu kamar (15-25°C) dina sakabéh prosés, ulah ngalakukeun és mandi jeung hawa low centrifugation.
2.The RNA geus didegradasi alatan pelestarian bener tina sampel atawa pelestarian jangka panjang sampel.
Rekomendasi: sampel Freshly dikumpulkeun kudu gancang beku dina nitrogén cair, lajeng disimpen dina -80 ° C pikeun lila, ulah ngulang katirisan sarta thawing sampel;atawa geura soak sampel dina larutan RNA stabilizer RNAlater (sampel sato).
3. Insufficient sampel fragméntasi na lysis ngakibatkeun sumbatan tina kolom purifikasi.
Saran: Nalika ngagiling jaringan, punten pastikeun yén jaringanna cekap digiling, sareng gancang-gancang mindahkeun kana panyangga PSL1 anu tos disiapkeun (pastikeun yén proporsi β-ME anu leres parantos ditambah, tingali léngkah 1 tina prosedur).
4.Eluent ieu ditambahkeun salah.
Saran: Pastikeun yén RNase-Free ddH2O diteteskeun kana tengah mémbran kolom purifikasi.
5.Volume bener étanol mutlak teu ditambahkeun kana panyangga PSL2 atanapi panyangga PRW2.
Saran: Mangga turutan parentah, tambahkeun volume bener etanol mutlak ka panyangga PSL2 jeung panyangga PRW2 jeung mix ogé saméméh kit dipaké.
6.Jumlah sampel jaringan teu pantes.
Saran: Anggo 50 mg jaringan per 500 μl Buffer PSL1.Ngagunakeun teuing jaringan bakal ngurangan jumlah RNA sari jeung purity RNA hasilna ogé bakal ngurangan.Kami nyarankeun pisan yén dosis sampel awal henteu kedah langkung ti 50 mg per operasi ékstraksi RNA.
7. Volume élusi teu pantes atawa élusi teu lengkep.
Saran: Volume eluent kolom purifikasi nyaéta 50-200 μl;lamun pangaruh élusi teu nyugemakeun, eta disarankeun pikeun manjangkeun waktu dina suhu kamar sanggeus nambahkeun preheated RNase-Free ddH2O, kayaning 5-10min.
8.Kolom purifikasi boga résidu étanol sanggeus ngumbah kalawan BufferPRW2.
Saran: Upami tabung kosong disentri pikeun 1 mnt sareng masih aya étanol sésana saatos dikumbah dina Panyangga PRW2, anjeun tiasa ningkatkeun waktos sentrifugasi tabung kosong ka 2 mnt, atanapi nempatkeun kolom purifikasi dina suhu kamar salami 5 mnt pikeun ngaleungitkeun étanol sésa.
9. kit ieu dipaké salah.
Saran: Pikeun sampel tutuwuhan polisakarida polifenolik, maké kit umum saperti Kit Isolasi RNA Total Tumbuhan bisa jadi teu bisa meunangkeun sampel RNA idéal.Kami ngarékoméndasikeun anjeun ngagunakeun Plant Total RNA IsolationKit Plus, anu dirarancang khusus pikeun sampel tutuwuhan polyphenolic polisakarida.Kit anu dikembangkeun khusus pikeun ékstrak RNA tina conto pepelakan polifenol sareng polisakarida.
OD260 / OD280 nilai low
Élusi RNA jeung ddH2O sarta dipaké pikeun maca spéktrofotométer ngahasilkeun nilai OD260/OD280 low.Kami ngarékoméndasikeun ngagunakeun 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (tinimbang RNase-Free ddH2O pikeun élute RNA) pikeun ménta nilai OD260/OD280 rélatif bener, tingali "Konsentrasi RNA jeung Assays Purifikasi" dina kaca 19.
RNA dimurnikeun didegradasi
Kualitas RNA anu dimurnikeun aya hubunganana sareng faktor sapertos pelestarian sampel, kontaminasi RNase, sareng manipulasi.
Analisis sabab umum:
1.Tissue sampel teu disimpen dina waktu sanggeus ngumpulkeun.
Rekomendasi: Lamun sampel jaringan teu dipaké dina waktu sanggeus ngumpulkeun, mangga nyimpen eta dina nitrogén cair dina suhu low geuwat atawa mindahkeun ka -80 ° C pikeun neundeun jangka panjang sanggeus katirisan gancang dina nitrogén cair, atawa geuwat neuleumkeun sampel dina RNA stabilizer RNAlater solusi (sato sato).Pikeun ékstraksi RNA, coba ngagunakeun sampel jaringan anyar dikumpulkeun.
2.Repeated katirisan jeung thawing sampel jaringan.
Saran: Nalika nyimpen sampel jaringan, leuwih sae pikeun motong kana potongan-potongan leutik pikeun pelestarian, sarta nyandak kaluar bagian tina eta nalika dipaké pikeun nyegah degradasi RNA disababkeun ku katirisan terus-terusan sarta thawing tina sampel.
3. RNase diwanohkeun di kamar operasi atawa teu dipaké sarung disposable, masker, jsb.
Saran: Percobaan ékstraksi RNA anu pangalusna dipigawé dina operasi RNA misah, sarta tabel laboratorium kudu cleaned saméméh percobaan, sarta sarung disposable jeung masker kudu dipaké salila percobaan pikeun nyegah degradasi RNA disababkeun ku bubuka RNase ka extent greatest.
4.The réagen ieu kacemar ku RNase salila pamakéan.
Saran: Ganti ku séri anyar kit ékstraksi RNA total tutuwuhan pikeun percobaan anu aya hubunganana.
5.The tabung centrifuge na tips pipette dipaké pikeun manipulasi RNA anu kacemar ku RNase.
Saran: Pastikeun yén tabung centrifuge, tip pipette, pipettes, jsb dipaké dina ékstraksi RNA sadayana RNase-Free.
Instruksi Manual:
Tutuwuhan Total RNA Isolasi Kit Ditambah Instruksi Manual
