Real Time PCR Easyᵀᴹ-Taqman
Katerangan Kit:
◮Basajan-2× Campuran PCR pikeun ngirangan kasalahan ékspérimén sareng waktos operasi
◮Panyangga khusus-dioptimalkeun sareng énzim Taq mimiti panas tiasa nyegah amplifikasi non-spésifik sareng pembentukan dimer primer
◮Sensitipitas luhur-bisa ngadeteksi salinan low tina citakan
◮Versatility alus-cocog jeung paling real-time instrumen kuantitatif PCR
Katerangan Kit
The 2X Real PCR GampangTMCampur-Taqman disadiakeun ku Real Time PCR EasyTM-Taqman kit mangrupikeun sistem premix énggal anu ngagunakeun panyilidikan fluoresensi khusus pikeun réaksi amplifikasi PCR Real Time, anu tiasa ningkatkeun spésifisitas produk sareng sensitipitas réaksi.ROX disayogikeun salaku pewarna kontrol internal.
2X Real PCR GampangTMCampur-Taqman ngandung panas-mimiti panas unik Foregene urang Taq DNA Polymerase.Dibandingkeun sareng énzim Taq biasa, éta gaduh kaunggulan efisiensi amplifikasi anu luhur, kamampuan amplifikasi spésifik anu kuat sareng tingkat mismatch anu rendah.Éta tiasa ngirangan amplifikasi non-spésifik sareng ningkatkeun akurasi PCR.
spésifikasi
| Real Time PCR GampangTM-Taqman | ||||
| Komposisi kit (sistem 20μl) | QP-01021 | QP-01022 | QP-01023 | QP-01024 |
| 200T | 500T | 1000T | 2000T | |
| 2×PCR nyatagampilTMNyampur-Taqman | 1 ml ×2 | 1.7 ml ×3 | 1.7 ml ×6 | 1.7 ml ×12 |
| 20×ROX Rujukan Dye | 200 μl | 0.5ml | 1 ml | 1 ml × 2 |
| ddH bébas-DNase2O | 1,7 ml | 1.7 ml ×2 | 10 ml | 20 ml |
| Iparentah | 1 | 1 | 1 | 1 |
Fitur & kauntungan
■ Basajan—2X PCR Mix pikeun ngurangan kasalahan ékspérimén jeung waktu operasi
■ panyangga spésifik-dioptimalkeun sareng énzim Taq mimiti panas tiasa nyegah amplifikasi non-spésifik sareng pembentukan dimer primer
■ Sensitipitas luhur-bisa ngadeteksi salinan low tina citakan
■ Versatility alus-cocog jeung paling real-time instrumen PCR kuantitatif
Aplikasi kit
analisis qPCR
Aliran gawé
Grafika
Panyimpenan sareng umur rak
Kit ieu kedah disimpen jauh tina cahaya sareng kedah disimpen dina -20 ℃.Upami sering dianggo, éta ogé tiasa disimpen dina suhu 4 ℃ kanggo waktos anu pondok (10 dinten).
Taya sinyal amplifikasi
1.The Taq DNA Polimérase dina kit leungiteun aktivitas na alatan neundeun bener atawa béakna kit.
Rekomendasi: Pastikeun kaayaan neundeun kit;tambahkeun deui jumlah luyu Taq DNA Polymerase kana sistem PCR atawa meuli Real Time PCR Kit anyar pikeun percobaan patali.
2. Aya loba sambetan Taq DNA Polimérase dina template DNA.
Saran: Repurify template atawa ngurangan jumlah template dipaké.
3.Konsentrasi Mg2+ teu cocog.
Rekomendasi: Konsentrasi Mg2+ tina 2 × Campuran PCR Nyata anu kami nyayogikeun nyaéta 3.5mM.Nanging, pikeun sababaraha primer sareng citakan khusus, konsentrasi Mg2+ tiasa langkung luhur.Ku alatan éta, Anjeun bisa langsung nambahkeun MgCl2 pikeun ngaoptimalkeun konsentrasi Mg2+.Disarankeun pikeun ngaronjatkeun Mg2 + 0.5mM unggal waktu pikeun optimasi.
4.The PCR kaayaan amplifikasi teu cocog, sarta urutan Primer atawa konsentrasi teu bener.
Saran: mastikeun kabeneran urutan primer sareng primer henteu didegradasi;lamun sinyal amplifikasi teu alus, coba nurunkeun suhu annealing tur saluyukeun konsentrasi Primer appropriately.
5.Jumlah template teuing saeutik atawa teuing.
Rekomendasi: Laksanakeun éncér gradién linierisasi template, sareng pilih konsentrasi citakan kalayan pangaruh PCR pangsaéna pikeun percobaan PCR Real Time.
NTC boga nilai fluoresensi teuing tinggi
1.Reagent kontaminasi disababkeun salila operasi.
Rekomendasi: Ganti ku réagen anyar pikeun percobaan PCR Real Time.
2.Kontaminasi lumangsung salila persiapan sistem réaksi PCR.
Rekomendasi: Candak ukuran pelindung anu diperyogikeun salami operasi, sapertos: ngagem sarung tangan lateks, nganggo tip pipette sareng saringan, jsb.
Primer 3.The didegradasi, sarta degradasi tina primers bakal ngabalukarkeun Gedekeun non-spésifik.
Saran: Paké SDS-PAGE éléktroforésis pikeun ngadeteksi naha primers anu didegradasi, sarta ngaganti eta kalawan primers anyar pikeun percobaan Real Time PCR.
Primer dimer atanapi amplifikasi non-spésifik
1.Konsentrasi Mg2+ teu cocog.
Rekomendasi: Konsentrasi Mg2 + tina 2 × Real PCR EasyTM Campuran kami nyayogikeun nyaéta 3,5 mM.Nanging, pikeun sababaraha primer sareng citakan khusus, konsentrasi Mg2+ tiasa langkung luhur.Ku alatan éta, Anjeun bisa langsung nambahkeun MgCl2 pikeun ngaoptimalkeun konsentrasi Mg2+.Disarankeun pikeun ngaronjatkeun Mg2 + 0.5mM unggal waktu pikeun optimasi.
2.The PCR annealing hawa teuing low.
Saran: Ningkatkeun suhu annealing PCR ku 1 ℃ atanapi 2 ℃ unggal waktos.
3.Produk PCR panjang teuing.
Rekomendasi: Panjang produk PCR Real Time kedah antara 100-150bp, teu langkung ti 500bp.
Primer 4.The didegradasi, sarta degradasi tina primers bakal ngakibatkeun penampilan Gedekeun husus.
Saran: Paké SDS-PAGE éléktroforésis pikeun ngadeteksi naha primers anu didegradasi, sarta ngaganti eta kalawan primers anyar pikeun percobaan Real Time PCR.
5.Sistim PCR teu bener, atawa sistem teuing leutik.
Saran: Sistem réaksi PCR leutik teuing bakal nyababkeun akurasi deteksi turun.Hadé pisan mun éta ngagunakeun sistem réaksi dianjurkeun ku alat PCR kuantitatif pikeun ngajalankeun deui percobaan Real Time PCR.
Kaulangan goréng tina nilai kuantitatif
1.Instrumén téh malfunctioning.
Saran: Bisa jadi aya kasalahan antara unggal liang PCR alat, hasilna reproducibility goréng salila manajemén suhu atawa deteksi.Mangga parios nurutkeun parentah alat nu pakait.
2.The purity sampel teu alus.
Rekomendasi: Sampel anu teu murni bakal nyababkeun réproduktifitas ékspérimén anu goréng, anu kalebet kamurnian citakan sareng primer.Hadé pisan mun éta repurify template, sarta primers anu pangalusna dimurnikeun ku SDS-kaca.
3.The préparasi sistem PCR jeung waktu neundeun panjang teuing.
Saran: Anggo sistem Real Time PCR pikeun percobaan PCR langsung saatos persiapan, sareng ulah ngantepkeunana kanggo lami teuing.
4.The PCR kaayaan amplifikasi teu cocog, sarta urutan Primer atawa konsentrasi teu bener.
Saran: mastikeun kabeneran urutan primer sareng primer henteu didegradasi;lamun sinyal amplifikasi teu alus, coba nurunkeun suhu annealing tur saluyukeun konsentrasi Primer appropriately.
5.Sistim PCR teu bener, atawa sistem teuing leutik.
Saran: Sistem réaksi PCR leutik teuing bakal nyababkeun akurasi deteksi turun.Hadé pisan mun éta ngagunakeun sistem réaksi dianjurkeun ku alat PCR kuantitatif pikeun ngajalankeun deui percobaan Real Time PCR.
