Langsung RT-qPCR Kit
Katerangan
Langsung RT-qPCR Kit nyadiakeun panyangga RT-qPCR rangkep misah jeung énzim efisien tinggicampuran (Taq, M-MLV, RI), sahingga merenah pikeun nyieun back-end kit jeung sistemadjustment, dina verifikasi basajan.
spésifikasi
500T, 50.000T
komponén Kit
eusi kit (Sistem réaksi 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50.000 T | |
Campuran Énzim Langsung | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
2 × panyangga RT-qPCR langsung | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
parentah | 1 | 1 |
Léngkah Operasi
Sateuacan persiapan réagen, sadaya réagen dina kit kedah dilebur dina suhu kamar sareng dicampurkeun lembut.
A: Nyiapkeun of citakan jeung réagen
1. Nyiapkeun RNA template disiapkeun (Disarankeun make Foregene Total RNA Isolasi Kit runtuyan kit pikeun nimba na purify RNA template) atawa sampel produk cracking (Disarankeun make sistem Foregene Lysis), primers husus (10 μM) sarta consumables relevan séjén, instrumen.
2. Pasang 2 × Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O sareng 20 × ROX Reference Dye (upami éta's diperlukeun) dina kotak kalayan és, sahingga ieu ngalembereh alami, sarta dicampur gently.
B: Nyiapkeun of RT-qPCR sistem
Méja 1 : Nyiapkeun of RT-qPCR system
Komponén | Jilid | Konsentrasi ahir |
2 × panyangga RT-qPCR langsung | 10 μL | 1 × |
Campuran Énzim Langsung | 1μL | |
Primer Maju (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
Primer Balik (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
Probe (4 μM) | 1μL | 200nM |
Citakan (RNA atanapi Lysate) | X μL | |
20 × ROX Rujukan Dye | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
Volume total | 20μL |
C: Nyetél éta RT-qPCR réaksi program
Méja 2 : RT-qPCR réaksion program setting (pikeun conto: dua-lengkah métode)
Lengkah | Suhu | Waktos | Siklus | eusi | |
1 | 50 ℃ | 15 mnt | 1* | 1 | Transkripsi sabalikna |
2 | 95 ℃ | 1 mnt | 1 | Pra-denaturasi | |
3 | 95 ℃ | 10 detik | 40-45 | Denaturasi | |
60 ℃ | 30 detik 2* | Anil / Extension |
Panyimpenan sarta hirup rak
- Kit kudu disimpen dina -20± 5℃.Mangsa validitas nyaéta 12 bulan.
-Hindarkeun siklus freeze-thaw (<5 siklus).