Kit ForeDirect RT-qPCR
Katerangan Kit:
◮Pikeun RNA amplifikasi real-time langsung tina kumpulan swab tanpa prosés purifikasi RNA.Kit ieu ngalengkepan siklus qRT-PCR dina hiji jam.Campuran énzim mangrupikeun campuran anu dioptimalkeun tina Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, inhibitor RNase.Réaksi panyangga ngandung sakabéh komponén diperlukeun, kaasup komponén panyangga dioptimalkeun, Mg2+, dUTP, jeung dNTPs.
Katerangan
Kit ForeDirect RT-qPCR dirancang pikeun RNA langsung real-time amplifikasi tina kumpulan swab tanpa prosés purifikasi RNA.Kit ieu ngalengkepan siklus qRT-PCR dina hiji jam.Campuran énzim mangrupikeun campuran anu dioptimalkeun tina Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, inhibitor RNase.Réaksi panyangga ngandung sakabéh komponén diperlukeun, kaasup komponén panyangga dioptimalkeun, Mg2+, dUTP, jeung dNTPs.
spésifikasi
100T
komponén Kit
| Agén ngaleupaskeun asam nukléat |
| pelindung RNA |
| 2 × RT-qPCR panyangga |
| Campuran Énzim (Taq&M-MLV) |
| parentah |
Aplikasi PCR
1. Sakali tabung réaksi PCR geus sakeudeung centrifuged, nempatkeun aranjeunna dina tank sampel alat amplifikasi.
2. Protokol termal
| Lengkah | Suhu | Waktos | Siklus | |
| 1 | Transkripsi sabalikna | 50 ℃ | 15 mnt | 1 |
| 2 | Pra-denaturasi | 95 ℃ | 1 mnt | 1 |
| 3 | Denaturasi | 95 ℃ | 10 detik | 42 |
| 4 | Anil / Extension | 60 ℃ | 30 detik | |
Catetan:Sinyal fluoresensi dideteksi langsung saatos léngkah perpanjangan unggal siklus.
3. Saatos setting, simpen file tur ngajalankeun program réaksi.
Léngkah Operasi
Sateuacan persiapan réagen, sadaya réagen dina kit kedah dilebur dina suhu kamar sareng dicampurkeun lembut.
Persiapan réagen
1. Nyiapkeun Campuran Pelepasan Asam Nukléat
| Komponén | Volume per Sampel atawa Control |
| Agén ngaleupaskeun asam nukléat | 5 μL |
| pelindung RNA | 0,5 μL |
2. Nyiapkeun Campur Réaksi
| Komponén | Volume per Sampel atawa Control |
| 2 × RT-qPCR panyangga | 15 μL |
| Campuran Énzim (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primer jeung Panyilidikan | 1 μL |
Panyimpenan sarta hirup rak
- Kit kudu disimpen dina -20± 5℃.Mangsa validitas nyaéta 12 bulan.
-Hindarkeun siklus freeze-thaw (<5 siklus).
