Langsung RT-qPCR Kit III
Katerangan Kit:
◮Kit RT-qPCR langsung, ngagunakeun Foreasy Reverse Transcriptase sareng Foreasy HS Taq DNA Polymerase ngembang ku Foregene, kalayan panyangga réaksi unik, ngajantenkeun kit ieu kalayan résistansi anu kuat sareng kasaluyuan, sareng éta tiasa langsung nguji réaksi nganggo sistem Foregene Lysis salaku citakan.Kit ieu tiasa nerapkeun kit deteksi asam nukléat COVID-19 sareng pamekaran kit deteksi asam nukléat baktéri patogén sanés.
Katerangan
Kit RT-qPCR langsung nyayogikeun panyangga RT-qPCR rangkep sacara misah (kalayan campuran polimérase DNA Foreasy HS Taq) sareng efisien tinggiForeasy Reverse Transcriptase (MMLV),sahingga merenah pikeun nyieun back-end kit jeung adjustment sistem, dina verifikasi basajan.
Kit RT-qPCR langsung, ngagunakeun Foreasy Reverse Transcriptase sareng Foreasy HS Taq DNA Polymerase ngembang ku Foregene, kalayan panyangga réaksi unik, ngajantenkeun kit ieu kalayan résistansi anu kuat sareng kasaluyuan, sareng éta tiasa langsung nguji réaksi nganggo sistem Foregene Lysis salaku citakan.Kit ieu tiasa nerapkeun kit deteksi asam nukléat COVID-19 sareng pamekaran kit deteksi asam nukléat baktéri patogén sanés.
Kit ieu tiasa langsung janten komponén produk IVD, nganggo gampang sareng gancang.Éta ngan ukur peryogi verifikasi anu gampang, tanpa ngembangkeun deui.
spésifikasi
500T, 50.000T
komponén Kit
| eusi kit (Sistem réaksi 20 μL) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase(200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| 2× qPCR langsungCampur-Taqman | 1 ml × 5 | 500 ml×1 |
| parentah | 1 | 1 |
Léngkah Operasi
A: Nyiapkeun tina citakan jeung réagen
1. Nyiapkeun RNA template disiapkeun (Disarankeun make Foregene Total RNA Isolasi Kit runtuyan kit pikeun nimba na purify RNA template) atawa sampel produk cracking (Disarankeun make sistem Foregene Lysis), primers husus (10 μM) sarta consumables relevan séjén, instrumen.
2. Pasang 2 × Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O sareng 20 × ROX Reference Dye (upami diperyogikeun) dina kotak kalayan és, ngajantenkeun ieu ngalembereh sacara alami, sareng dicampur lembut.
B: Nyiapkeun sistem RT-qPCR
Kéngingkeun satengah volume panyangga réaksi sistem réaksi (contona, upami volume sistem nyaéta 20 μL, éta kedah kéngingkeun 10 μL 2 × Penyangga RT-qPCR Langsung). Pikeunjumlah énzim anu cocog, kami nyarankeun yénM-MLV: 10-30 U/20 μL sistem réaksi,TaqDNA polimérase:1-2 U/20 μL Sistim réaksiIeu saran kami, anjeun kudu nguji sarta saluyukeun eta), tambahkeun template RNA, primer sareng panyilidikan khusus, sareng tambahkeun ddH Bebas RNase2O nepi ka 20 μL.Persiapan spésifik sistem réaksi RT-qPCR tiasa dirujuk kana tabél 1 di handap ieu.
Méja 1: Nyiapkeun sistem RT-qPCR
| Komponén | Jilid | Konsentrasi ahir |
| 2 × panyangga RT-qPCR langsung | 10 μL | 1 × |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polimérase | 1-2 U | |
| Primer Maju (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Primer Balik (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Citakan (RNA atanapi Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Rujukan Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volume total | 20 μL |
Catetan: Forward Primer jeung Reverse Primer mangrupakeun primers husus gén target.Sistem qPCR tiasa disaluyukeun dumasar kana modél ékspérimén sareng PCR praktis.Kami nyarankeun 400nM pikeun konsentrasi ahir kalolobaan primer.Saluyukeun volume primers husus sarta panyilidikan nurutkeun konsentrasi disiapkeun jeung konsentrasi ahir dianjurkeun, mangga.
1*: Pilih konsentrasi ahir ROX Reference Dye anu cocog dumasar kana instrumen PCR kuantitatif anu béda.Konsentrasi ROX Reference Dye optimal pikeun instrumen PCR kuantitatif umum dipidangkeun dina tabel ieu:
| Instrumén PCR kuantitatif | Konsentrasi ahir ROX Rujukan Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Lengkah Hiji,jsb. | 1× (contona, tambahkeun 1μl 20×ROX Reference Dye dina sistem réaksi 20 μL) |
| ABI 7500, 7500 gancang, Stratagene Mx3000P, Mx3005P na Mx4000, jsb. | 0,5 × (contona, tambahkeun 0,5μl 20 × ROX Reference Dye dina sistem réaksi 20 μL) |
| Instrumen PCR Roche, instrumen PCR Bio-Rad, instrumen PCR kuantitatif Eppendorf, jsb. | Tanpa ROX Rujukan Dye |
Panyimpenan sarta hirup rak
Kit kudu disimpen dina -20 ± 5 ℃.Eta kudu geuwat disimpen dina -20 ℃ kulkas thermostatic.Mangsa validitas 2 taun upami disimpen dina kaayaan anu cocog.
