Pituduh pikeun analisis masalah

The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。

Henteu aya RNA anu tiasa diekstrak atanapi ngahasilkeun asam nukléat rendah

Biasana aya seueur faktor anu mangaruhan efisiensi pamulihan, sapertos: eusi sampel RNA, metode operasi, volume élusi, jsb.

Analisis sabab umum:

1.És mandi atawa-suhu low (4 ° C) centrifugation salila operasi.

Saran: Operasi suhu kamar (15-25 ° C), henteu pernah mandi és sareng centrifuge suhu rendah.

2. Panyimpenan sampel anu teu leres atanapi panyimpen sampel pikeun panjang teuing.

Saran: Simpen conto dina -80 ° C atanapi beku dina nitrogén cair, sareng ulah aya pamakean freeze-thaw;coba ngagunakeun sampel anyar dikumpulkeun pikeun ékstraksi RNA.

3.Lisis sampel teu cukup

Rekomendasi: Punten pastikeun yén sampel sareng solusi anu tiasa dianggo (Linear Acrylamide) parantos dicampur tuntas sareng diinkubasi salami 10 mnt dina suhu kamar (15-25 ° C)

4.Eluent ieu ditambahkeun salah

Rekomendasi: Pastikeun yén RNase-Free ddH2O ditambahkeun kana tengah mémbran kolom purifikasi.

5.Volume Improper étanol anhidrat dina panyangga viRW2

Saran: Punten turutan petunjukna, tambahkeun volume étanol anhidrat anu leres kana Buffer viRW2 sareng campur ogé sateuacan nganggo kit.

6.Improper pamakéan sampel.

Saran: 200µl sampel per 500µl Buffer viRL.Volume sampel kaleuleuwihan bakal ngakibatkeun ngurangan laju ékstraksi RNA.

7. Volume élusi teu bener atawa élusi teu lengkep.

Saran: Volume eluent kolom purifikasi nyaéta 30-50μl;Upami pangaruh élusi henteu nyugemakeun, disarankeun pikeun nambihan ddH Bebas RNase anu dipanaskeun.₂O sareng manjangkeun waktos nempatkeun dina suhu kamar, sapertos 5-10min

8.Kolom purification boga résidu étanol sanggeus rinsing di panyangga viRW2.

Saran: Upami étanol masih tetep saatos dikumbah dina Buffer viRW2 sareng séntrifugasi tabung-kosong salami 2 menit, kolom purifikasi tiasa ditinggalkeun dina suhu kamar salami 5 menit saatos séntrifugasi tabung-kosong pikeun ngaleungitkeun sésa-sésa étanol.

Degradasi molekul RNA dimurnikeun

Kualitas RNA anu dimurnikeun aya hubunganana sareng faktor sapertos panyimpenan sampel, kontaminasi RNase, sareng operasi.

Analisis sabab umum:

1.The sampel dikumpulkeun teu disimpen dina jangka waktu.

Saran: Lamun sampel teu dipaké dina waktu sanggeus ngumpulkeun, mangga nyimpen eta dina -80 ℃ atawa nitrogén cair langsung.Pikeun ékstraksi molekul RNA, coba ngagunakeun sampel anyar dikumpulkeun sabisana.

2.Collected sampel anu katirisan sarta thawing sababaraha kali.

Saran: Hindarkeun katirisan sareng pencairan (henteu langkung ti sakali) salami ngumpulkeun sareng neundeun sampel, upami henteu ngahasilkeun asam nukléat bakal turun.

3. RNase diwanohkeun di kamar operasi atawa euweuh sarung disposable, masker, jsb anu dipaké.

Saran: Ékstraksi molekul RNA ékspérimén pangalusna dipigawé di kamar operasi RNA misah, sarta tabel ékspérimén cleaned saméméh percobaan.Anggo sarung tangan sareng masker anu tiasa dianggo salami ékspérimén pikeun nyegah degradasi RNA disababkeun ku bubuka RNase.

4.The réagen kacemar ku RNase salila pamakéan.

Saran: Ganti ku Kit Isolasi RNA Viral anyar pikeun percobaan anu aya hubunganana.

5.The kontaminasi RNase tina tabung centrifuge, tips pipette, jsb Saran: Pastikeun yén tabung centrifuge, tips pipette, sarta pipettes sadayana RNase-Free.

Molekul RNA dimurnikeun mangaruhan percobaan hilir

Molekul RNA dimurnikeun ku kolom purifikasi bakal mangaruhan percobaan hilir lamun aya teuing ion uyah atawa protéin, kayaning: reverse transcription, Northern Blot, jsb.

1. Aya sésana ion uyah dina molekul RNA eluted.

Rekomendasi: Pastikeun yén volume anu bener tina étanol anhidrat geus ditambahkeun kana panyangga viRW2, sarta ngumbah kolom purifikasi dua kali nurutkeun laju centrifugation bener dina parentah operasi; Lamun masih aya ion uyah sésana, Anjeun bisa nambah panyangga viRW2 kana kolom purifikasi, sarta ninggalkeun dina suhu kamar salila 5 menit.Lajeng ngalakukeun centrifugation pikeun miceun kontaminasi ion uyah ka extent greatest

2. Aya sésa étanol dina molekul RNA élusi

Saran: sakali confirming yén kolom purifikasi geus rinsed ku panyangga viRW2, ngalakukeun centrifugation tabung-kosong nurutkeun speed centrifugal on parentah operasi.Lamun masih aya étanol sésana, éta bisa ditinggalkeun pikeun 5 menit dina suhu kamar sanggeus hiji centrifugation tabung-kosong pikeun miceun étanol sésana ka extent greatest.

Instruksi Manual:

Viral RNA Isolasi Kit Instruksi Manual